文献概述
细胞疗法，包括使用装载肿瘤抗原的树突状细胞作为治疗性癌症疫苗，为恶性肿瘤患者提供了治疗选择。研究者在一项单臂I/II期临床研究中评估了使用Wilms肿瘤蛋白（WT1）mRNA电穿孔自体树突状细胞（WT1-mRNA/DC）进行辅助疫苗接种的可行性、安全性、免疫原性和临床活性，研究对象为接受标准治疗的晚期实体瘤患者。Zwi N.Berneman等人发表在Journal ofHematology&Oncology上的文章报告了该研究结果，评估了晚期实体瘤患者接种WT1mRNA树突状细胞疫苗的可行性、安全性、免疫原性和临床活性。
研究方法
本试验纳入40例预后不良的晚期肿瘤患者，包括13例胶质母细胞瘤（Glioblastoma multiforme，GBM）、4例转移性乳腺癌（Metastatic breast cancer，MBC）、10例恶性胸膜间皮瘤（Malignant pleural mesothelioma，MPM）、4例肉瘤或罕见肿瘤（脑干星形细胞瘤）。所有患者均患有转移性或局部晚期疾病，并且根据现有的金标准至少接受过一次先前治疗。
疫苗接种：将冷冻保存的疫苗（每次接种预期含有10×10⁶个树突状细胞）解冻后，皮内注射在上臂内侧，距腋窝淋巴结大约5 - 10厘米。按计划每两周接种一次，持续6个月。根据具体临床情况和疫苗供应情况考虑是否需要继续进行疫苗接种。
免疫反应评估：在首次接种WT1-mRNA/DCs疫苗（V1）后的8周后（即T1时间点）的时间点进行迟发型超敏反应（DTH）皮肤试验。免疫监测在基线（PRE时间点，通常在V1）、V1后的8周（POST时间点，通常与DTH测试在同一天）以及预期治疗阶段结束时（FIN时间点）进行。采用流式细胞术直接对淋巴细胞亚群进行体外分析，对WT1特异性CD8⁺T淋巴细胞进行计数。采用胞内细胞因子染色法检测表达1型细胞因子IFN-γ和TNF-α和/或2型细胞因子IL-5的抗原特异性CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞。使用ELISA法测定血浆WT1 IgG浓度，使用四种WT1肽段作为捕获抗原，将每种抗体阳性的临界值设定为吸光度值0.15。
临床反应评估：在接种疫苗前或开始时（V1）、T1（V1后8周）、T2（V1后6个月）进行评估，采用MRI或CT或PET-CT评估肿瘤情况。根据RECIST 1.1标准确定临床反应。需评价总缓解率（完全/部分缓解患者的百分比）、疾病控制率（完全/部分缓解或稳定患者的百分比）、中位总生存期（OS），并与文献中预期的OS进行比较。
研究结果
疗效：在时间点T1，疾病控制率和总有效率分别为64.1%和5.1%，在时间点T2，疾病控制率和总有效率分别为48.7%和12.8%。多形性胶质母细胞瘤患者的中位总生存期（OS）为43.7个月。转移性乳腺癌患者为41.9个月，恶性胸膜间皮瘤患者为48.8个月，与先前报道的16.0个月、37.2个月和23.4个月的数据相比，均有优势。24/39例患者在T1和/或T2时观察到病情稳定（12/39例患者未接受任何伴随治疗），这可能解释了OS方面观察到的益处。与T1或T2未实现疾病控制相比，T1时病情稳定，T2时病情得到控制，中位OS较长。所有达到部分或完全缓解的患者在WT1-mRNA/DC疫苗接种期间也接受了伴随治疗。（原发性脑肿瘤的疗效数据见表1，表S1）
表1.按患者组划分的临床反应和总生存期
表S1.GBM队列——个体患者特征及结果
免疫反应：除了1/38的测试患者（SOL36）有延迟型超敏反应。大多数患者在T1和/或T2时也表现出1型T淋巴细胞反应，包括对WT1的IFN-γ+和/或TNF-α+CD4+T淋巴细胞反应和IFN-γ+CD8+T淋巴细胞反应及对KLH的TNF-α+CD4+T淋巴细胞反应。大多数患者在基线时表现出抗原非特异性的2型T淋巴细胞（CTL）反应，这种反应不受WT1-mRNA/DC疫苗接种的持续影响，而抗原特异性的1型T淋巴细胞和CTL反应在WT1-mRNA/DC疫苗接种后在大多数病例中重新出现。
而疾病控制与1型细胞因子反应性相关。疾病控制与WT1或KLH特异性的淋巴细胞反应之间存在直接关联。WT1特异性的IFN-γ+CD4+T淋巴细胞反应与OS直接相关。与先前报道的相同，抗原特异性1型CD4+和/或CD8+T淋巴细胞反应与临床结果相关。研究还发现WT1-mRNA/DC疫苗诱导的整体免疫反应具有一定程度的同步性。
该研究的早期临床研究已经证明了WT1-mRNA/DC疫苗在各种实体肿瘤患者中的安全性、可行性、1型免疫原性和临床活性，并表明对OS有潜在的有益影响。抗原特异性1型T淋巴细胞反应与临床结果（疾病控制和OS）相关。由于该研究是在预先选择的一组患者中进行的，因此需要进一步的临床研究来确认WT1-mRNA/DC的临床疗效。
