Cell子刊：启函生物杨璐菡联合浙江大学，开发iPSC来源的多基因编辑CD70-CAR-NK细胞疗法

撰文丨王聪

编辑丨王多鱼

排版丨水成文

过继细胞疗法，作为一种活细胞药物，彻底改变了癌症治疗的传统观念。尤其是基于嵌合抗原受体（CAR）的修饰，显著提高了免疫疗法的效果，为此前无法治愈的血液系统恶性肿瘤提供了潜在治愈方法。

截至目前，美国 FDA 已批准了 7 款 CAR-T 细胞疗法上市，但它们的适应证范围仍然有限，未能充分满足大量癌症患者的需求。再加上自体 CAR-T 细胞复杂的定制制造流程，导致此类疗法存在着成本高、制造失败的固有风险和可及性延迟等问题。

因此，研究人员希望开发出新一代细胞疗法——能够对各种类型的肿瘤具有广泛适用性性，同时也适用于工业化规模的生产流程。

2025年1月9日，启函生物杨璐菡及浙江大学黄河、胡永仙、王东睿等在 Cell 子刊Cell Reports Medicine上发表了题为： CD70-targeted iPSC-derived CAR-NK cells display potent function against tumors and alloreactive T cells 的研究论文。

该研究表明，四重基因编辑、CD70 靶向的 iPSC 来源的 NK 细胞——70CAR-iNK，可以有效靶向肿瘤细胞和同种异体 T 细胞，同时实现广泛的肿瘤类型覆盖、优越的增殖能力、增强的抗体依赖的细胞毒性作用（ADCC）以及对同种异体 T 细胞排斥反应的抵抗，在克服目前细胞治疗的局限性方面具有巨大潜力，是下一代通用免疫细胞疗法的有力候选者。

免疫检查点分子CD70在血液系统肿瘤和实体瘤中均有广泛表达，已成为一个重要免疫治疗靶点。靶向 CD70 的疗法，包括抗体-药物偶联物（ADC）、抗体，以及 CAR-T 细胞，在治疗急性髓系白血病（AML）、淋巴瘤、肾细胞癌（RCC）及其他疾病方面已展现出良好的疗效。

由于其内在机制，自然杀伤（NK）细胞能够强力清除广泛分布的肿瘤。临床数据证实，过继自然杀伤细胞输注，在治疗急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征、乳腺癌、卵巢癌等疾病方面具有潜力。

然而，肿瘤细胞上 NCR/NKG2DL 的减少，通常会削弱 NK 细胞的固有抗肿瘤功能，从而使癌细胞得以逃逸。因此，将 CD70 靶向与基于 NK 细胞的细胞毒性作用相结合，有望最大程度地扩大癌症类型的覆盖范围，并可能对异质性癌症的治疗产生效果。

随着细胞治疗的发展，为了以更低的成本和即时可用的方式满足患者的需求，通用型细胞疗法的开发已成为一个热门的研究领域。但移植物抗宿主病（GvHD）和宿主抗移植物活性（HvGA）是临床应用的重要障碍，这增加了毒性风险，限制了其抗肿瘤活性。

为了减少移植物抗宿主病（GvHD），敲除 αβ T细胞受体是阻断 T 细胞同种异体反应的常用策略。相反，缺乏T细胞受体的 NK 细胞被认为是固有的通用细胞产品。为了减少宿主抗移植物活性（HvGA），临床上使用阿仑单抗（抗CD52单抗）非特异性清除患者的宿主淋巴细胞，从而使 CD52 敲除的过继免疫细胞高效增殖。但这种方法往往导致严重的免疫抑制，大大增加了致死性脓毒症的风险。

在这项最新研究中，研究团队认为，CD70 靶向的 NK 细胞可能是减少同种异体排斥反应的一个有希望的候选细胞。

该团队此前开发了一个平台，用于人诱导多能干细胞（iPSC）来源的 NK 细胞（iNK）的稳健分化和扩增。与从外周血或脐带血中分离的 NK 细胞相比，多基因编辑修饰 iPSC 更可行，iPSC 可在临床规模上诱导出更具一致性的 NK 细胞。利用该平台，研究团队开发了一种能够靶向多种肿瘤的多重基因修饰的 iNK 细胞，命名为——70CAR-iNK。

此外，将高亲和力和不可裂解的 CD16（hnCD16）引入 70CAR-iNK 细胞中，可增强其抗体依赖的细胞毒性作用（ADCC）。研究团队还加入了 IL-15 受体α/IL-15 融合蛋白（IL15RF），以提高 iNK 细胞的持久性，而无需外源性细胞因子的支持，并通过敲除 CD70 来防止 70CAR-iNK 细胞的自相残杀。

通过与多种肿瘤细胞系共培养，以及在人类淋巴瘤和肾癌的异种移植小鼠体内实验，研究团队检测了 70CAR-iNK 细胞的抗肿瘤效果。研究团队还分析了在诱导同种异体反应性 T 细胞期间表面 CD70 表达的动态变化，并验证了 70CAR-iNK 细胞抑制同种异体排斥反应活性的效力。

实验结果显示，四重基因编辑的 70CAR-iNK 细胞对多种肿瘤表现出强大的细胞毒性作用，体内异种移植模型进一步证明了其有效靶向淋巴瘤和肾癌的效力。此外，该研究还发现，移植受体的同种异体反应性 T 细胞表达了高水平的 CD70，其被被 70CAR-iNK 细胞清除，从而提高了 iNK 细胞的存活率和持久性。